動態(tài)光散射粒度儀，也稱為動態(tài)光散射粒度分析儀是一種廣泛應用于材料科學、生物科學、化學工程等領域的先進儀器。其工作原理主要基于顆粒在溶液或懸浮液中的布朗運動。當激光束照射到這些顆粒上時，顆粒會散射出光波。由于顆粒的布朗運動是隨機的，且運動速度與顆粒的大小和媒介粘度有關，因此散射光的強度會隨時間發(fā)生波動。通過檢測這種光強波動，可以分析出顆粒的擴散系數(shù)，進而利用Stokes-Einstein公式計算出顆粒的粒徑大小。

　　動態(tài)光散射粒度儀的使用方法如下：

　　一、安裝與準備

　　環(huán)境選擇

　　安裝場所需平穩(wěn)、干燥、溫度適宜，避免空氣流動、震動及強電磁干擾（如大型電機、高頻設備）。

　　儀器底部與地面平穩(wěn)接觸，光路垂直地面，底部離地面至少50厘米。

　　儀器檢查

　　檢查電源線、電纜、激光器、樣品池等部件是否完好，連接是否牢固。

　　安裝激光器、聚焦透鏡、樣品池等關鍵組件，確保穩(wěn)固且正確連接。

　　校準儀器

　　進行零點校準、量程校準等步驟，使用標準粒子（如聚苯乙烯乳膠）驗證測量準確性。

　　定期校準，確保儀器長期穩(wěn)定性。

　　二、樣品制備

　　分散性要求

　　樣品需均勻分散在液體介質中，避免團聚或沉淀。

　　蛋白質樣品：14kDa蛋白濃度建議1mg/ml，28kDa蛋白濃度建議0.5mg/ml；其他樣品根據(jù)粒徑調整濃度，避免多重光散射（濃度過高）或信號過弱（濃度過低）。

　　除氣泡處理

　　樣品需12,000rpm離心10分鐘，取上清液，避免氣泡影響測量。

　　樣品量控制

　　樣品池容量約14μl，建議準備20μl樣品以確保填滿。

　　三、操作步驟

　　開機與預熱

　　接通電源，依次打開主機、溫控模塊及計算機電源。

　　預熱儀器10-15分鐘，待系統(tǒng)穩(wěn)定后運行測量軟件（如Zetasizer、IRSoft等）。

　　軟件連接與參數(shù)設置

　　建立軟件與儀器的連接，確認連接成功后圖標變綠。

　　輸入溶劑的折光率（RI）和粘度（Viscosity），參數(shù)隨溫度變化需實時更新。

　　輸入樣品的折光率（RI）和吸收率（Absorption），蛋白質樣品需選擇“Material”類型并輸入對應參數(shù)。

　　設置測量時間（如連續(xù)測量3次，每次120秒）、溫度（如25℃）、激光強度（高濃度樣品需降低功率）、散射角度（通常90°適用于小顆粒，173°適用于大顆粒）。

　　樣品放置與測量

　　用微量取液器將樣品緩慢注入樣品池，避免針頭刮碰池底或側壁。

　　將樣品池放入樣品室，確保箭頭朝向自己，蓋上樣品室蓋子。

　　點擊“Start”或“Measure”開始測量，儀器自動記錄散射光強度隨時間的變化。

　　測量過程中避免觸碰儀器或樣品池，防止光路偏移。

　　四、數(shù)據(jù)處理與分析

　　數(shù)據(jù)過濾

　　設置偏差范圍（如Baseline=1±0.003），過濾異常數(shù)據(jù)（紅色數(shù)據(jù)為超出設定范圍的值，分析時不采用）。

　　結果輸出

　　軟件自動計算流體力學半徑（Rh）及多分散性指數(shù)（PDI），生成粒徑分布圖（如對數(shù)正態(tài)分布、MSD多尺寸分布）。

　　分析相關性函數(shù)，評估樣品均一性。

　　數(shù)據(jù)導出

　　保存為CSV、Excel或PDF格式，便于進一步處理或報告生成。

　　五、清潔與維護

　　樣品池清潔

　　測量完成后立即用水沖洗樣品池，吹干后存放，避免殘留樣品污染。

　　光學元件維護

　　定期清潔光學元件（如激光窗口、探測器），使用無塵布或專用清洗劑。

　　檢查儀器內部是否有雜物或塵埃，保持光路系統(tǒng)干燥管吸潮狀態(tài)（如吸潮需烘干再生）。

　　儀器存放

　　儀器不使用時存放在干燥、通風、無腐蝕性氣體的環(huán)境中，斷開電源并蓋上防塵罩。

　　避免與危險化學品接觸，防止安全事故。